微針治療系統(tǒng)比強(qiáng)脈沖光有更好的膠原沉積作用（摘譯：lordhobo）

只看該作者 · 發(fā)表于 2011-4-10 08:24:25

微針治療系統(tǒng)比強(qiáng)脈沖光有更好的膠原沉積作用（摘譯：lordhobo）
原文：
Greater Collagen Deposition with the Microneedle Therapy System Than with Intense Pulsed Light
Dermatologic Surgery
SEONG-EON KIM et al South Korea
Early View

摘譯：lordhobo

強(qiáng)脈沖光（IPL）被用于治療毛細(xì)血管擴(kuò)張、脫毛和色斑，現(xiàn)在在非燒灼性嫩膚治療中也越來(lái)越流行。有數(shù)據(jù)表明IPL可以顯著增加前膠原I和III同時(shí)顯著減少間質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-1和MMP-2，證明IPL對(duì)真皮膠原重塑有益處，盡管IPL治療需要受過(guò)訓(xùn)練和有經(jīng)驗(yàn)的人操作且激光設(shè)備昂貴。

皮膚針治療疤痕和皺紋是個(gè)有效的方法。皮膚針可以通過(guò)穿刺完成，盡管穿刺技術(shù)是用于經(jīng)皮給藥，穿刺和環(huán)鉆也可以改善疤痕。皮膚針治療可以斷裂疤痕和皺紋中老的膠原絲，這可以促進(jìn)去除損傷的膠原產(chǎn)生并立即誘導(dǎo)表皮下更多的膠原產(chǎn)生。多個(gè)微針在痤瘡疤痕上滾動(dòng)可以增加膠原和彈性蛋白量。使用滾動(dòng)的微針的優(yōu)點(diǎn)是表皮仍是完整的，最小化如激光重建等燒灼方法產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)。此外，微針治療技術(shù)簡(jiǎn)單，顯示可以立即改善。我們發(fā)現(xiàn)微針治療17例痤瘡疤痕患者后，8周內(nèi)可以顯著增加表皮和真皮皮下連接之間的超聲距離，顯示較好的臨床效果（數(shù)據(jù)未顯示）。IPL和微針治療可能比燒灼方法有優(yōu)點(diǎn)，但沒有這2種技術(shù)之間的比較研究被報(bào)道。我們使用小鼠作為模型通過(guò)對(duì)膠原合成和皮膚厚度研究比較了IPL和皮膚微針改善痤瘡疤痕的作用。

材料和方法

動(dòng)物模型制備
44只10周大有印記控制區(qū)域的小鼠用于研究。它們喂的是標(biāo)準(zhǔn)飲食，住在溫度為23℃、濕度為25%并且12小時(shí)亮、12小時(shí)暗的恒定環(huán)境中。小鼠分成3組：未治療的對(duì)照組，IPL（Ellipse Flex，Danish Dermatologic Development）治療組和微針治療系統(tǒng)（MTS，0.5mm Dermaroller，Clinical Resolution，Brea，CA）治療組。治療前，所有小鼠用2mg/0.1mL的三溴乙醇腹膜內(nèi)麻醉。小鼠背部用電動(dòng)剃刀剃去毛發(fā)，然后用80%的巰基乙酸（Niclean Cream，IL Dong Pharm，Seoul，Korea）使它變裸。

治療
18只小鼠背部皮膚外用冷卻超聲凝膠后使用能量為10.5J/cm2的IPL單次照射。IPL的波長(zhǎng)范圍從555到950nm。使用2個(gè)脈沖，脈沖持續(xù)時(shí)間2.5ms，延遲10ms。其他18只小鼠背部接受5遍MTS治療（總計(jì)15次）。MTS含有192個(gè)距離為2.5mm的針。針的厚度為0.25mm，逐漸變?yōu)?.125mm細(xì)的尖部。IPL和MTS以3周為間隔進(jìn)行3次治療。

皮膚厚度測(cè)量
最后1次治療后4周，背部皮膚的厚度用測(cè)徑器（Mituyoto，Mituyoto Corp.，Kawasaki，Japan）測(cè)量。

顯微鏡檢查
8只未經(jīng)治療的對(duì)照組小鼠和每個(gè)治療組的4只小鼠用5mm直徑鉆孔器取皮膚樣本進(jìn)行顯微鏡檢查。樣本用10%福爾馬林固定并用石蠟包埋。樣本然后切片并用蘇木精、伊紅和馬森三色進(jìn)行染色。測(cè)量8只對(duì)照小鼠的表皮和皮下脂肪之間的距離與用測(cè)徑器測(cè)量的皮膚厚度進(jìn)行比較。

蛋白印跡分析
15只小鼠（每組5只）的皮膚活檢樣本放在冰冷的含有50mMTri-base（pH8.0）、150mM氯化鈉、2mM乙二胺四乙酸、1%甘油、10mM氟化鈉、10mM焦磷酸鈉和蛋白酶抑制劑（0.1mM苯甲基磺酰氟化物、5g/mL的抑肽酶和5g/mL的亮抑蛋白酶肽）的均一化緩沖液中進(jìn)行均一化處理。等量的萃取蛋白（30g）用8%到12.5%的十二烷硫酸鈉聚丙烯凝膠電泳并形成硝酸纖維素膜。用5%的脫脂奶粉在氨丁三醇緩沖鹽液（pH7.6）中封閉后，膜放在可檢測(cè)前體并使小鼠、鼠和人來(lái)源的1:1000牛血清中的1型膠原成熟的抗COL1A1抗體（山羊多克隆；sc-8784，Santa Cruz Biotechnology，Inc.，Santa Cruz，CA）中4℃孵育過(guò)夜。膜然后進(jìn)一步放在鼠抗山羊過(guò)氧化物酶結(jié)合抗體中孵育。膜用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光溶液（ECL試劑盒；Amersham Life Sciences，Buckinghamshire，UK）處理，信號(hào)用Image Reader（LAS-3000，F(xiàn)uji Photo Film，Tokyo，Japan）捕獲。為了檢測(cè)每個(gè)泳道的蛋白量，膜用條形緩沖處理并用單克隆抗體抗β-肌動(dòng)蛋白（Sigma-Aldrich，St. Louis，MO）作為探針。蛋白帶用光密度測(cè)定法分析。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
總膠原量被測(cè)定用于定量分析。根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明使用Sircol 膠原試劑盒（Biocolor Ltd.，Belfast，Northern Ireland）。所有小鼠的真皮皮膚樣本放在10mL的含有1mg每10mg組織殘?jiān)?.5M乙酸中進(jìn)行均一化處理。均一化的樣本在4℃下輕輕震蕩孵育24小時(shí)。離心后，100μL的上清液加到1mL的Sircol染料試劑中并混合30分鐘以讓試劑與蛋白結(jié)合。離心后，小球懸浮在1mL的堿試劑中，用450nm的分光光度計(jì)閱讀吸光度。膠原濃度（μg/mL）被測(cè)定與標(biāo)準(zhǔn)化膠原作比較。

統(tǒng)計(jì)分析
數(shù)據(jù)用方差單向分析來(lái)分析。每2組比較用Tukey-Kramer多種比較檢驗(yàn)。測(cè)徑器測(cè)量的皮膚厚度和顯微鏡下真皮厚度之間關(guān)系用Spearman等級(jí)相關(guān)試驗(yàn)來(lái)分析。使用NCSS2007軟件（NCSS，Kaysville，UT）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

結(jié)果

測(cè)徑器測(cè)量的皮膚厚度和顯微鏡下真皮厚度之間關(guān)系
測(cè)徑器測(cè)量的皮膚厚度大約2.4倍于顯微鏡下真皮厚度（相關(guān)系數(shù)=0.845，P＜0.05）（圖1），所以在進(jìn)一步的試驗(yàn)中代替了顯微鏡下真皮厚度。

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2011-3-23 11:34

MTS比IPL治療有較大的皮膚厚度增加
最后1次治療4周后背部皮膚的厚度用測(cè)徑器測(cè)量。IPL治療、MTS治療和未治療的厚度范圍分別為860-1370μm、1060nm-1530μm和800-1100μm，平均值分別為1100.0±153.9、1266.1±121.6和910.0±90.9μm（P＜0.05）。所有的組都不同于其他組（圖2）。

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2011-3-23 11:34

MTS治療組增加的膠原比IPL治療組多
2個(gè)治療組的真皮厚度都增加，特別是MTS。增加的染色和膠原在馬森三色染色中厚度的增加（圖3）說(shuō)明膠原總量增加。每組的5個(gè)樣本的I型膠原纖維水平用蛋白印跡分析測(cè)定。2個(gè)治療組的α1鏈的I型膠原表達(dá)都比未治療組要多，MTS治療組比IPL治療組更高（P＜0.05；圖4）。

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2011-3-23 11:34

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同樣的樣本用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）來(lái)定量分析膠原水平。IPL治療后膠原水平范圍從9.8到29.5μg/mL（平均19.2±4.6μg/mL），MTS治療后膠原水平范圍從12.9-53.3μg/mL（平均25.2±9.5μg/mL），而未治療組的膠原水平范圍從7.5到20.2μg/mL（平均12.7±3.3μg/mL），所有組之間都有顯著差異（P＜0.05；圖5）。

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2011-3-23 11:34

討論

MTS和IPL通過(guò)測(cè)徑器測(cè)量都增加皮膚厚度（圖2），MTS治療組增加最大。顯微鏡下真皮厚度是膠原改變的真皮厚度的一種測(cè)量方法，但它需要皮膚活檢和顯微鏡檢查。顯微鏡真皮厚度與測(cè)徑器皮膚厚度之間改變較大，有2.4倍差距（圖1）。因此，用測(cè)徑器測(cè)量皮膚厚度作為篩選方法可以代替顯微鏡真皮測(cè)量。微針可以增加痤瘡疤痕中的膠原纖維和彈性蛋白。Sircol染料的ELISA分析顯示未治療和治療組之間以及IPL治療組和MTS治療組之間有顯著的不同（圖5），證明MTS治療組水平最高。真皮中有7種不同類型的膠原，具有不同的成份和抗原性，I型膠原和III型膠原分別是真皮網(wǎng)狀層和乳頭層的主要成份。其他類型的膠原在其他部位，例如II型膠原在軟骨中，IV型膠原在基底膜，而VII型膠原在基底膜和固著性原纖維，可能與疤痕改善無(wú)關(guān)。I型膠原是成人皮膚中最突出的類型。使用蛋白印跡分析法分析有限數(shù)量的小鼠顯示MTS增加I型膠原水平比IPL更多（圖4）�？傊�，MTS比IPL更能增加真皮中的膠原沉積，說(shuō)明MTS可能比IPL治療疤痕更有效。轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出自論壇@醫(yī)學(xué)美容時(shí)訊 http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/,本貼地址:http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/viewthread.php?tid=9294