微針治療系統(tǒng)比強脈沖光有更好的膠原沉積作用(摘譯:lordhobo) 原文: Greater Collagen Deposition with the Microneedle Therapy System Than with Intense Pulsed Light Dermatologic Surgery SEONG-EON KIM et al South Korea Early View
摘譯:lordhobo
強脈沖光(IPL)被用于治療毛細血管擴張、脫毛和色斑,現(xiàn)在在非燒灼性嫩膚治療中也越來越流行。有數(shù)據(jù)表明IPL可以顯著增加前膠原I和III同時顯著減少間質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-1和MMP-2,證明IPL對真皮膠原重塑有益處,盡管IPL治療需要受過訓練和有經(jīng)驗的人操作且激光設(shè)備昂貴。
皮膚針治療疤痕和皺紋是個有效的方法。皮膚針可以通過穿刺完成,盡管穿刺技術(shù)是用于經(jīng)皮給藥,穿刺和環(huán)鉆也可以改善疤痕。皮膚針治療可以斷裂疤痕和皺紋中老的膠原絲,這可以促進去除損傷的膠原產(chǎn)生并立即誘導表皮下更多的膠原產(chǎn)生。多個微針在痤瘡疤痕上滾動可以增加膠原和彈性蛋白量。使用滾動的微針的優(yōu)點是表皮仍是完整的,最小化如激光重建等燒灼方法產(chǎn)生的風險。此外,微針治療技術(shù)簡單,顯示可以立即改善。我們發(fā)現(xiàn)微針治療17例痤瘡疤痕患者后,8周內(nèi)可以顯著增加表皮和真皮皮下連接之間的超聲距離,顯示較好的臨床效果(數(shù)據(jù)未顯示)。IPL和微針治療可能比燒灼方法有優(yōu)點,但沒有這2種技術(shù)之間的比較研究被報道。我們使用小鼠作為模型通過對膠原合成和皮膚厚度研究比較了IPL和皮膚微針改善痤瘡疤痕的作用。
材料和方法
動物模型制備 44只10周大有印記控制區(qū)域的小鼠用于研究。它們喂的是標準飲食,住在溫度為23℃、濕度為25%并且12小時亮、12小時暗的恒定環(huán)境中。小鼠分成3組:未治療的對照組,IPL(Ellipse Flex,Danish Dermatologic Development)治療組和微針治療系統(tǒng)(MTS,0.5mm Dermaroller,Clinical Resolution,Brea,CA)治療組。治療前,所有小鼠用2mg/0.1mL的三溴乙醇腹膜內(nèi)麻醉。小鼠背部用電動剃刀剃去毛發(fā),然后用80%的巰基乙酸(Niclean Cream,IL Dong Pharm,Seoul,Korea)使它變裸。
治療 18只小鼠背部皮膚外用冷卻超聲凝膠后使用能量為10.5J/cm2的IPL單次照射。IPL的波長范圍從555到950nm。使用2個脈沖,脈沖持續(xù)時間2.5ms,延遲10ms。其他18只小鼠背部接受5遍MTS治療(總計15次)。MTS含有192個距離為2.5mm的針。針的厚度為0.25mm,逐漸變?yōu)?.125mm細的尖部。IPL和MTS以3周為間隔進行3次治療。
皮膚厚度測量 最后1次治療后4周,背部皮膚的厚度用測徑器(Mituyoto,Mituyoto Corp.,Kawasaki,Japan)測量。
顯微鏡檢查 8只未經(jīng)治療的對照組小鼠和每個治療組的4只小鼠用5mm直徑鉆孔器取皮膚樣本進行顯微鏡檢查。樣本用10%福爾馬林固定并用石蠟包埋。樣本然后切片并用蘇木精、伊紅和馬森三色進行染色。測量8只對照小鼠的表皮和皮下脂肪之間的距離與用測徑器測量的皮膚厚度進行比較。
蛋白印跡分析 15只小鼠(每組5只)的皮膚活檢樣本放在冰冷的含有50mMTri-base(pH8.0)、150mM氯化鈉、2mM乙二胺四乙酸、1%甘油、10mM氟化鈉、10mM焦磷酸鈉和蛋白酶抑制劑(0.1mM苯甲基磺酰氟化物、5g/mL的抑肽酶和5g/mL的亮抑蛋白酶肽)的均一化緩沖液中進行均一化處理。等量的萃取蛋白(30g)用8%到12.5%的十二烷硫酸鈉聚丙烯凝膠電泳并形成硝酸纖維素膜。用5%的脫脂奶粉在氨丁三醇緩沖鹽液(pH7.6)中封閉后,膜放在可檢測前體并使小鼠、鼠和人來源的1:1000牛血清中的1型膠原成熟的抗COL1A1抗體(山羊多克隆;sc-8784,Santa Cruz Biotechnology,Inc.,Santa Cruz,CA)中4℃孵育過夜。膜然后進一步放在鼠抗山羊過氧化物酶結(jié)合抗體中孵育。膜用增強化學發(fā)光溶液(ECL試劑盒;Amersham Life Sciences,Buckinghamshire,UK)處理,信號用Image Reader(LAS-3000,F(xiàn)uji Photo Film,Tokyo,Japan)捕獲。為了檢測每個泳道的蛋白量,膜用條形緩沖處理并用單克隆抗體抗β-肌動蛋白(Sigma-Aldrich,St. Louis,MO)作為探針。蛋白帶用光密度測定法分析。
酶聯(lián)免疫吸附試驗 總膠原量被測定用于定量分析。根據(jù)產(chǎn)品說明使用Sircol 膠原試劑盒(Biocolor Ltd.,Belfast,Northern Ireland)。所有小鼠的真皮皮膚樣本放在10mL的含有1mg每10mg組織殘渣的0.5M乙酸中進行均一化處理。均一化的樣本在4℃下輕輕震蕩孵育24小時。離心后,100μL的上清液加到1mL的Sircol染料試劑中并混合30分鐘以讓試劑 與蛋白結(jié)合。離心后,小球懸浮在1mL的堿試劑中,用450nm的分光光度計閱讀吸光度。膠原濃度(μg/mL)被測定與標準化膠原作比較。
統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)用方差單向分析來分析。每2組比較用Tukey-Kramer多種比較檢驗。測徑器測量的皮膚厚度和顯微鏡下真皮厚度之間關(guān)系用Spearman等級相關(guān)試驗來分析。使用NCSS2007軟件(NCSS,Kaysville,UT)進行統(tǒng)計分析。P<0.05認為有統(tǒng)計學意義。所有數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差。
結(jié)果
測徑器測量的皮膚厚度和顯微鏡下真皮厚度之間關(guān)系 測徑器測量的皮膚厚度大約2.4倍于顯微鏡下真皮厚度(相關(guān)系數(shù)=0.845,P<0.05)(圖1),所以在進一步的試驗中代替了顯微鏡下真皮厚度。
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2011-3-23 11:34
MTS比IPL治療有較大的皮膚厚度增加 最后1次治療4周后背部皮膚的厚度用測徑器測量。IPL治療、MTS治療和未治療的厚度范圍分別為860-1370μm、1060nm-1530μm和800-1100μm,平均值分別為1100.0±153.9、1266.1±121.6和910.0±90.9μm(P<0.05)。所有的組都不同于其他組(圖2)。
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2011-3-23 11:34
MTS治療組增加的膠原比IPL治療組多 2個治療組的真皮厚度都增加,特別是MTS。增加的染色和膠原在馬森三色染色中厚度的增加(圖3)說明膠原總量增加。每組的5個樣本的I型膠原纖維水平用蛋白印跡分析測定。2個治療組的α1鏈的I型膠原表達都比未治療組要多,MTS治療組比IPL治療組更高(P<0.05;圖4)。
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2011-3-23 11:34
同樣的樣本用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)來定量分析膠原水平。IPL治療后膠原水平范圍從9.8到29.5μg/mL(平均19.2±4.6μg/mL),MTS治療后膠原水平范圍從12.9-53.3μg/mL(平均25.2±9.5μg/mL),而未治療組的膠原水平范圍從7.5到20.2μg/mL(平均12.7±3.3μg/mL),所有組之間都有顯著差異(P<0.05;圖5)。
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2011-3-23 11:34
討論
MTS和IPL通過測徑器測量都增加皮膚厚度(圖2),MTS治療組增加最大。顯微鏡下真皮厚度是膠原改變的真皮厚度的一種測量方法,但它需要皮膚活檢和顯微鏡檢查。顯微鏡真皮厚度與測徑器皮膚厚度之間改變較大,有2.4倍差距(圖1)。因此,用測徑器測量皮膚厚度作為篩選方法可以代替顯微鏡真皮測量。微針可以增加痤瘡疤痕中的膠原纖維和彈性蛋白。Sircol染料的ELISA分析顯示未治療和治療組之間以及IPL治療組和MTS治療組之間有顯著的不同(圖5),證明MTS治療組水平最高。真皮中有7種不同類型的膠原,具有不同的成份和抗原性,I型膠原和III型膠原分別是真皮網(wǎng)狀層和乳頭層的主要成份。其他類型的膠原在其他部位,例如II型膠原在軟骨中,IV型膠原在基底膜,而VII型膠原在基底膜和固著性原纖維,可能與疤痕改善無關(guān)。I型膠原是成人皮膚中最突出的類型。使用蛋白印跡分析法分析有限數(shù)量的小鼠顯示MTS增加I型膠原水平比IPL更多(圖4)。總之,MTS比IPL更能增加真皮中的膠原沉積,說明MTS可能比IPL治療疤痕更有效。轉(zhuǎn)載請注明出自論壇@醫(yī)學美容時訊 http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/,本貼地址:http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/viewthread.php?tid=9294 |